从原理到应用,一篇文章让你了解色谱柱!
色谱柱是色谱仪的核心部件之一,它的工作原理是基于对物质分子的亲和性差异。色谱柱中填充了一定量的吸附剂或分离剂,当样品通过色谱柱时,不同物质分子与这些吸附剂或分离剂的亲和力不同,在柱中停留时间也不同,从而分离出来。色谱柱有多种类型,在气相色谱中最常使用两种色谱柱是填充柱和毛细管柱。
左图为毛细管柱,右图为填充柱
填充柱:
填充色谱柱由一个金属或玻璃的柱体构成,其中充满了固定相颗粒。这些固定相颗粒可以是液体(液态固定相)或固体(固态固定相)。典型的气相色谱填充柱长为2m-4m,内径在2mm到4mm之间,谱峰呈宽峰。
填充柱内部结构示意图
毛细管柱:
毛细管柱是一个长且细的二氧化硅管在其内壁涂有固定相薄膜,膜的厚度非常薄,内衬有液相或吸附剂材料或具有化学键合层。因此,将这种色谱柱称为涂壁空心柱(WCOT)。
毛细管柱常规内径尺寸为0.1、0.25、0.32、0.53 毫米,长度是5至100m(最常见的是30m)。毛细管柱分离效果要优于填充柱,但品种较少,柱容量低,谱峰呈尖峰。
毛细管柱内部结构示意图
色谱柱的选择:
色谱柱影响分离效果的主要因素
按极性选择:
选择具有与目标化合物极性接近的极性的色谱柱。
非极性化合物分析→非极性色谱柱
极性化合物分析→强极性色谱柱
按分析目标选择:
分析目标化合物沸点相差较大→非极性色谱柱
异构体或其他沸点相差较小的化合物→强极性色谱柱
按所需分离度进行选择:
需要高分离度→内径:细,长度:长
需要分析时间短,分离充分→内径:粗,长度:短,涂层厚度:薄
(长度:色谱柱长度会影响柱效、保留时间和色谱柱内压力。色谱柱子长度增加,柱效和压力会增加,分析时间也会相应延长。
内径:色谱柱内径会影响柱效、保留时间、载气流速、柱容量和色谱柱内压力。恒温条件下色谱柱内径和保留时间成反比。)
按分析目标选择
低沸点化合物分析→长度:长、涂层厚度:厚
高沸点化合物分析→长度:短、涂层厚度:薄